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慕容宁国细菌扫描电镜样品制备方法

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细菌扫描电镜是一种研究细菌结构和功能的重要工具。 为了获得清晰的电镜图像,需要对样品进行制备以去除杂质和固定细胞结构。本文将介绍细菌扫描电镜样品制备方法。

细菌扫描电镜样品制备方法

1. 取样

首先需要从待研究的细菌培养基中取出足够的细胞样品。将培养皿轻轻振荡数次,使细胞均匀分布。取出的细胞样品应富含细胞,以确保能够获得清晰的电镜图像。

2. 固定

将取样的培养皿放入预热至60-70℃的固定箱中,保温10-15分钟。在此过程中,细胞会逐渐失去活性,但同时也会被固定在培养皿底部。将培养皿从固定箱中取出,稍稍冷却。

3. 洗涤

将培养皿放入离心机中,以去除其中的空气。将培养皿旋转数次,确保培养皿内部充满洗涤液。将培养皿从离心机中取出,用培养皿底部的洗涤液涂抹样品。

4. 染色

将培养皿放入染色箱中,将样品染色。常用的染色剂是结晶紫-铬矾。染色时间根据需要而定,通常为10-30分钟。染色结束后,将培养皿从染色箱中取出,用吸水纸吸去多余的染色剂。

5. 干燥

将培养皿放入离心机中,以去除其中的水分。将培养皿旋转数次,确保培养皿内部充满干燥剂。将培养皿从离心机中取出,放在真空干燥箱中,将水分真空干燥。

6. 样品制备

将干燥的培养皿放入扫描电镜样品制备系统中。扫描电镜样品制备系统通常包括一个旋转器和一个固定的样品台。旋转器将样品台旋转,以便在不同的角度下观察样品。固定样品台确保样品不会移动,从而获得清晰的电镜图像。

7. 分析

将扫描电镜样品制备系统中的样品台放入预热至100-120℃的箱中,保温2-5分钟。在此过程中,样品中的结晶紫-铬矾会逐渐沉淀,使样品更清晰。将样品台从箱中取出,放在扫描电镜样品台上,观察样品。

8. 数据收集

使用扫描电镜软件捕获图像,并使用分析软件进行处理和分析。分析可以包括评估结晶紫-铬矾沉积的均匀性、测量细胞形态和结构等。

细菌扫描电镜样品制备方法包括取样、固定、洗涤、染色、干燥和样品制备。这些步骤的目的是去除杂质和固定细胞结构,以便获得清晰的电镜图像。通过这些方法,可以更好地理解细菌的结构和功能。

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慕容宁国标签: 培养皿 样品 电镜 制备 染色

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